Peroksidaza (vir hrena) Sinonim: vodikov peroksid oksidoreduktaza;HRP
Opis
Hrenova peroksidaza (HRP) je izolirana iz korenin hrena (Amoracia rusticana) in spada v feroprotoporfirinsko skupino peroksidaz.HRP se zlahka poveže z vodikovim peroksidom (H2O2).Nastali kompleks [HRP-H2O2] lahko oksidira široko paleto donorjev vodika:
Donor + H2O2 → Oksidirani Donor + 2 H2O
HRP bo oksidiral različne substrate (glej tabelo 1):
• Kromogeno
• Kemiluminiscenca (kot je luminol ali izoluminol)
• Fluorogeni (kot so tiramin, homovanilna kislina ali 4-hidroksifenil ocetna kislina)
HRP je enoverižni polipeptid, ki vsebuje štiri disulfidne mostove.HRP je glikoprotein, ki vsebuje 18% ogljikovih hidratov.Sestava ogljikovih hidratov je sestavljena iz galaktoze, arabinoze, ksiloze, fukoze, manoze, manozamina in galaktozamina, odvisno od specifičnega izocima.
HRP je široko uporabljena oznaka za imunoglobuline v številnih različnih imunokemijskih aplikacijah, vključno z imunoblotingom, imunohistokemijo in ELISA.HRP je mogoče konjugirati s protitelesi z več različnimi metodami, vključno z glutaraldehidom, perjodatno oksidacijo, prek disulfidnih vezi in tudi preko amino in tiolno usmerjenih navzkrižnih povezovalcev.HRP je najbolj zaželen označevalec protiteles, saj je najmanjši in najbolj stabilen od treh najbolj priljubljenih encimskih označevalcev (peroksidaza, β-galaktozidaza, alkalna fosfataza) in njegova glikozilacija vodi do nižje nespecifične vezave.Objavljen je bil pregled metod konjugacije glutaraldehida in periodata.
Peroksidaza se uporablja tudi za določanje glukoze4 in peroksidov v raztopini.Več publikacij, 6-24 tez, 25-29 in disertacije 30-46 so navedle uporabo P8375 v svojih raziskovalnih protokolih.
Kemijska zgradba
Specifikacija
Preizkusni predmeti | Specifikacije |
Opis | Rdečkasto rjav amorfen prašek, liofiliziran |
dejavnost | ≥100 U/mg |
Čistost (SDS-PAGE) | ≥90 % |
Topnost (10 mg praška/ml) | jasno |
Kontaminantni encimi | |
NADH/NADPH oksidaza | ≤0,1 % |
Katalaza | ≤0,005 % |
ATPaza | ≤0,03 % |
Prevoz in skladiščenje
Prevozništvo:Pošilja se pod 2-8°C
Shranjevanje:Shranjujte pri -20°C (dolgoročno), 2-8°C (kratkotrajno)
Priporočen ponovni testživljenje:2 leti