Predmešanica Multiplex One Step RT-qPCR
Opis
Kataloška št.: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix je multipleksni kvantitativni komplet za PCR, ki temelji na RNA kot predlogi.V poskusu se reverzna transkripcija in kvantitativna PCR izvedeta v isti reakcijski epruveti, kar poenostavi eksperimentalno delovanje in zmanjša tveganje kontaminacije.Edinstvena zasnova mešanice pufra in encimov se lahko uporablja v enostopenjskem liofiliziranem sistemu.Komplet uporablja toplotno odporno reverzno transkriptazo za učinkovito sintezo prve verige cDNA z uporabo hotstart Taq DNA polimeraze za kvantitativno pomnoževanje.Vsebuje optimiziran reakcijski pufer, mešanico encimov itd., dodani pa so bili tudi dejavniki, ki učinkovito zavirajo pomnoževanje nespecifične PCR in povečajo učinkovitost pomnoževanja večkratnih reakcij qPCR, kar omogoča večkratno kvantitativno pomnoževanje fluorescence, hkrati pa zagotavlja učinkovitost pomnoževanja primerjev.
Komponente
| Ime |
| 1. Lio-pufer |
| 2. Lio-encimska mešanica |
| 3. Lio zaščita |
Pogoj prevozaion
O: Lio-pufer in zaščitno sredstvo: -25~-15 ℃, rok uporabnosti je 1 leto.
B: Lio-encimska mešanica, 2-8 ℃, rok uporabe 6 mesecev.
Navodilo za uporabo
1. Reakcijski sistem (za primer vzemite 25 μL)
| Komponente | Prostornina (μL) | Končna koncentracija |
| Lio-pufer | 6 | 1* |
| Lio-encimska mešanica | 1 | - |
| Lio-zaščita | 8 | - |
| Primerna mešanica (10 μM) | 1 | 0,1-1 uM |
| Mešanica sonde (10 μM) | 0,5 | 0,05-0,5 uM |
| Predloga RNA | 5 | - |
| DEPC H2O | Do 25 | - |
2. Optimiziran kolesarski protokol
1) Standardni kolesarski protokol
| Stopnja reakcije | Temperatura | Čas | Cikel | |
| 1 | Povratni prepis | 50°Ca | 10 min | 1 |
| 2 | Začetna denaturacija | 95°C | 5 min | 1 |
| 3 | Reakcija ojačanja | 95°C | 15 sekund | 45 ciklov |
| 60°Cb | 30 sekundc |
2) Protokol hitrega kolesarjenja
|
| Stopnja reakcije | Temperatura | Čas | Cikel |
| 1 | Povratni prepis | 50°Ca | 2 min | 1 |
| 2 | Začetna denaturacija | 95°C | 2sek | 1 |
| 3 | Reakcija ojačanja | 95°C | 1 sekunda |
45 ciklov |
| 60°Cb | 13sekc |
Opomba:
a) Vzvratno prepisovanje: Temperatura se lahko nastavi na 42°C ali 50°C za 10-15 minut.
b) Reakcija ojačanja: Temperatura je prilagojena glede na vrednost Tm oblikovanih temeljnih premazov.
c)Fluorescenca signal pridobitev: Nastavite poskusni postopek v skladu z zahtevamipriročnik za instrument.
Tehnične informacije/specifikacije
| Vroči začetek | Vgrajen vroč zagon |
| Metoda odkrivanja | Zaznavanje primerjalne sonde |
| PCR metoda | Enostopenjski RT-qPCR |
| Vrsta vzorca | RNA |
Opombe
1. Ta izdelek je samo za raziskovalno uporabo.
2. Prosimo, nosite potrebno osebno zaščitno opremo, kot je laboratorijski plašč in rokavice, da zagotovite svoje zdravje in varnost！
