Alkalna fosfataza (ALP)

Cas št.:9001-78-9

Št. ES: 3.1.3.1

Pakiranje: 100μL, 500μL, 10mL, 100mL, 1000mL

Opis izdelka

Opis

Alkalna fosfataza je pridobljena iz rekombinantnega seva E. coli, ki nosi gen TAB5.Encim katalizira defosforilacijo 5' in 3' koncev fosfomonoestrov DNA in RNA.Prav tako hidrolizira ribozo in deoksiribonukleozidne trifosfate (NTP in dNTP).Alkalna fosfataza TAB5 deluje na 5' štrleče, 5' vdolbine in tope konce.Fosfatazo je mogoče uporabiti v številnih aplikacijah molekularne biologije, kot je kloniranje ali označevanje koncev sonde za odstranitev fosforiliranih koncev DNA ali RNA.V poskusih kloniranja defosforilacija prepreči, da bi se linearizirana plazmidna DNA samoligirala.Prav tako lahko razgradi neinkorporirane dNTP v reakcijah PCR, da pripravi predlogo za sekvenciranje DNA.Encim je popolnoma in ireverzibilno inaktiviran s 5-minutnim segrevanjem pri 70 °C, zaradi česar je odstranitev fosfataze pred ligacijo ali končnim označevanjem nepotrebna

Uporaba

1. Alkalna fosfataza, povezana z beljakovinami (protitelesa, streptavidin itd.), lahko specifično identificira ciljne molekule in se lahko uporablja pri ELISA, WB in histokemičnem odkrivanju;
2. Alkalno fosfatazo lahko uporabimo za defosforizacijo 5'-terminala DNA ali RNA, da preprečimo samopovezovanje;
3. Zgornjo defosforilirano DNA ali RNA je mogoče označiti z radioaktivno označenimi fosfati (prek polinukleotidne kinaze T4)

Kemijska zgradba

Specifikacija

Preizkusni predmeti	Specifikacije
Encimska aktivnost	5U/μl
Aktivnost endonukleaze	Ni zaznan
Aktivnost eksonukleaze	Ni zaznan
Nicking Dejavnost	Ni zaznan
Aktivnost RNaze	Ni zaznan
E.coli DNK	≤1 kopija/5U
Endotoksin	LAL-test, ≤10EU/mg
Čistost	≥95 %