Komplet za ekstrakcijo virusne DNA/RNA
Ta komplet je primeren za hitro ekstrakcijo visoko čiste virusne DNA/RNA iz vzorcev, kot so nazofaringealni brisi, brisi okolja, supernatanti celične kulture in supernatanti tkivnega homogenata.Komplet temelji na tehnologiji čiščenja membrane silicijevega dioksida, ki odpravlja potrebo po uporabi organskih topil fenol/kloroform ali dolgotrajnem obarjanju z alkoholom za ekstrakcijo virusne DNA/RNA visoke kakovosti.Pridobljene nukleinske kisline so brez nečistoč in pripravljene za uporabo v nadaljnjih poskusih, kot so reverzna transkripcija, PCR, RT-PCR, PCR v realnem času, sekvenciranje naslednje generacije (NGS) in Northern blot.
Pogoji shranjevanja
Shranjujte pri 15 ~ 25 ℃ in prevažajte pri sobni temperaturi
Komponente
| Komponente | 100RXNS |
| Medpomnilnik VL | 50 ml |
| Medpomnilnik RW | 120 ml |
| ddH2 O brez RNaze | 6 ml |
| FastPure RNA kolone | 100 |
| Zbirne cevi (2 ml) | 100 |
| Epruvete za zbiranje brez RNaze (1,5 ml) | 100 |
Medpomnilnik VL:Zagotovite okolje za lizo in vezavo.
Medpomnilnik RW:Odstranite ostanke beljakovin in druge nečistoče.
ddH2O brez RNaze:Izperite DNA/RNA z membrane v vrtilni koloni.
Stolpci FastPure RNA:Posebej adsorbira DNA/RNA.
Epruvete za zbiranje 2 ml:Zberite filtrat.
Zbirne epruvete brez RNaze 1,5 ml:Zberi DNA/RNA.
Aplikacije
Nazofaringealni brisi, brisi okolja, supernatanti celične kulture in supernatanti tkivnega homogenata.
Samopripravljena Materials
Konice pipet brez RNaze, 1,5 ml centrifugalne epruvete brez RNaze, centrifuga, vrtinčni mešalnik in pipete.
Eksperimentalni proces
Izvedite vse naslednje korake v omari za biološko varnost.
1. Dodajte 200 μl vzorca v epruveto za centrifugiranje brez RNaze (v primeru nezadostnega vzorca dopolnite s PBS ali 0,9 % NaCl), dodajte 500 μl pufra VL, dobro premešajte z vrtinčenjem 15 – 30 sekund in centrifugirajte na kratko, da zberete mešanico na dnu epruvete.
2. Postavite kolone FastPure RNA v zbirne epruvete 2 ml.Prenesite mešanico iz 1. koraka v kolone FastPure RNA, centrifugirajte pri 12.000 obratih na minuto (13.400 × g) 1 minuto in zavrzite filtrat.
3. Dodajte 600 μl pufra RW v kolone FastPure RNA, centrifugirajte pri 12.000 obratih na minuto (13.400 × g) 30 sekund in zavrzite filtrat.
4. Ponovite 3. korak.
5. Prazno kolono centrifugirajte 2 minuti pri 12.000 obratih na minuto (13.400 × g).
6. Previdno prenesite kolone FastPure RNA v nove zbiralne epruvete brez RNaze 1,5 ml (priložene v kompletu) in dodajte 30–50 μl ddH2O brez RNaze na sredino membrane, ne da bi se dotaknili kolone.Pustite stati pri sobni temperaturi 1 minuto in centrifugirajte 1 minuto pri 12.000 obratih na minuto (13.400 × g).
7. Zavrzite stolpce FastPure RNA.DNA/RNA se lahko uporabi neposredno za nadaljnje teste ali pa se shrani pri -30 ~ -15 °C za kratek čas ali -85 ~ -65 °C za daljše obdobje.
Opombe
Samo za raziskovalno uporabo.Ni za uporabo v diagnostičnih postopkih.
1. Vzorce vnaprej uravnotežite na sobno temperaturo.
2. Virusi so zelo nalezljivi.Pred poskusom zagotovite, da ste sprejeli vse potrebne varnostne ukrepe.
3. Izogibajte se ponavljajočemu zamrzovanju in odmrzovanju vzorca, saj lahko to povzroči razgradnjo ali zmanjšan izkoristek ekstrahirane virusne DNA/RNA.
4. Oprema, ki jo pripravite sami, vključuje konice pipet brez RNaze, 1,5 ml centrifugalne epruvete brez RNaze, centrifugo, vrtinčni mešalnik in pipete.
5. Pri uporabi kompleta nosite laboratorijski plašč, rokavice iz lateksa za enkratno uporabo in masko za enkratno uporabo ter uporabljajte potrošni material brez RNaze, da zmanjšate tveganje kontaminacije z RNazo.
6. Izvedite vse korake pri sobni temperaturi, razen če ni navedeno drugače.
Mehanizem in potek dela
