Ultra Nuclease GMP
Kataloška št.: HC2016A
UltraNuclease GMP-grade je izražen in prečiščen v Escherichia coli (E.coli) z genskim inženiringom in pripravljen v okolju GMP.Zmanjša lahko viskoznost celičnega supernatanta in celičnega lizata v znanstvenih raziskavah, poveča učinkovitost čiščenja beljakovin in okrepi funkcionalne raziskave beljakovin.Izdelek lahko tudi zmanjša ostanke nukleinske kisline gostitelja na pg-grade, izboljša učinkovitost in varnost bioloških proizvodov aplikacij, vključno s čiščenjem virusov, proizvodnjo cepiv in farmacevtsko proizvodnjo beljakovin/polisaharidov.Poleg tega se lahko izdelek uporablja tudi za preprečevanje združevanja mononuklearnih celic periferne krvi človeka (PBMC) pri celični terapiji in razvoju cepiva.
UltraNuclease je na voljo v obliki steriliziranega reagenta, eluiranega v pufru (20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50 % glicerin), z videzom brezbarvne, prozorne tekočine.Ta izdelek je proizveden v skladu z zahtevami postopka GMP in je na voljo v tekoči obliki.
Komponente
UltraNuclease GMP-grade (250 U/μL)
Pogoji shranjevanja
Izdelek je dobavljen s suhim ledom in ga lahko shranjujete pri -25 ℃ ~ -15 °C dve leti.
Če je izdelek odprt in je bil shranjen pri 4℃ več kot teden dni, priporočamo filtriranjeizdelek za preprečevanje mikrobne kontaminacije.
Specifikacije
| Gostitelj izraza | Rekombinantna E. coli z genom UltraNuclease |
| Molekularna teža | 26,5 kDa |
| soelektrična točka | 6.85 |
| Čistost | ≥99 % (SDS-PAGE) |
| Medpomnilnik za shranjevanje | 20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50 % glicerin |
|
Definicija enote | Opredelitev ene enote aktivnosti (U) je količina encima, ki se porabi zaspremeni vrednost absorpcije ΔA260 za 1,0 v 30 minutah v 2,625 mlreakcijski sistem pri 37 ℃ s pH 8,0 (enakovredno popolni razgradnji37 μg DNA sperme lososa v oligonukleotide). |
Navodila
1. Vzorec Zbirka
Sprijete celice: odstranite medij, celice sperite s PBS in odstranite supernatant.
Suspenzijske celice: celice zberemo s centrifugiranjem, celice speremo s PBS, centrifugiramo pri 6000vrtljajev na minuto 10 minut, zberite pelet.
Escherichia coli: zberite bakterije s centrifugiranjem, enkrat sperite s PBS, centrifugirajte pri 8000vrtljajev na minuto 5 minut in zberite pelet.
2. Obdelava vzorca
Zbrane celične pelete obdelajte z liznim pufrom v razmerju med maso (g) in prostornino (mL) 1:(10-20) ali z mehanskimi ali kemičnimi metodami na ledu ali pri sobni temperaturi (1 g celične pelete vsebuje približno
109 celic).
3. Encimsko zdravljenje
Dodajte 1–5 mM MgCl v reakcijski sistem in naravnajte pH na 8–9.
Dodajte UltraNuclease v razmerju 250 enot, da prebavite 1 g celičnih peletov, inkubirajte pri 37 ℃ več kot 30 minut.Za izbiro glejte obrazec »Priporočeni reakcijski čas«.trajanje zdravljenja.
4. Supernatant Zbirka
Centrifugirajte pri 12.000 obratih na minuto 30 minut in zberite supernatant.
Opomba: Če je raztopina kisla ali alkalna ali vsebuje visoke koncentracije soli, detergentov ozdenaturantov, povečajte odmerek encima ali ustrezno podaljšajte čas zdravljenja.
Priporočeni reakcijski pogojions
| Parameter | Optimalno stanje | Učinkovit balzam |
| Mg²+Koncentracija | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Temperatura | 37 ℃ | 0-42 ℃ |
| DTT koncentracija | 0-100 mM | >0 mM |
| Koncentracija merkaptoetanola | 0-100 mM | >0 mM |
| Koncentracija monovalentnega kationa | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Koncentracija fosfata | 0-10 mM | 0-100 mM |
Priporočeno Reakcija Čas (37 ℃, 2 mM Mg²+, pH 8,0)
| Količina ultranukleaze (končna koncentracija) | Reakcijski čas |
| 0,25 E/ml | > 10 ur |
| 2,5 E/ml | >4 ure |
| 25 E/ml | 30 min |
Opombe:
Prosimo, da nosite potrebno osebno zaščitno opremo, kot je laboratorijski plašč in rokavice, da zagotovite svoje zdravje in varnost!
